طراحی و ساخت پلاسمید حاوی کاست بیانی فیوژن پروتئین cfp-۱۰، esat-۶ مایکوباکتریوم توبرکولوزیس
Authors
abstract
زمینه و اهداف: در قرن گذشته تنها روش تشخیص عفونت نهفته مایکوباکتریوم توبرکولوزیس آزمایش پوستی توبرکولین بود. این آزمایش در بیماران آلوده با دیگر مایکوباکتریوم ها و در افراد واکسینه با bcg نتایج مثبت کاذب دارد. لذا، لزوم روش های تشخیصی کارآمد، سریع و دقیق مطرح می شود. دو آنتی ژن cfp-10و esat-6 در تمام مایکوباکتریوم های پاتوژن وجود دارد ولی در سویه های مولد واکسن bcgو مایکوباکتریوم های فرصت طلب از جمله مایکوباکتریوم آویوم وجود ندارد. هدف این مطالعه ساخت سازه بیانی فیوژن پروتئین متشکل از دو ژن اختصاصی رمز کننده cfp-10و esat-6 بود. این فیوژن پروتیین در آزمایش اختصاصی تشخیص عفونت فعال و نهفته مایکو باکتریوم توبر کولوزیس به کار برده می شود. روش بررسی: dna مایکوباکتریوم توبرکولوزیس(h37rv )استخراج و تعیین غلظت گردید. برای تکثیر قطعات esat-6 ، cfp-10 و قطعه شامل esat-6 و cfp-10 پرایمر طراحی گردید و pcr و overlap pcr انجام شد. محصول pcr حاصل از فیوژن esat-6 و cfp-10 در پلاسمید ptz57t/a کلون شد. سپس پلاسمید pqe-60 وpt-esat-cfp با دو آنزیم bamhi و ncoi هضم شد. محصول هضم آنزیمی روی ژل آگارز، الکتروفورز شد. باندهای dna حاوی esat-cfp و pqe-60 خطی شده از ژل آگارز استخراج گردید. قطعه esat-cfp در pqe-60 کلون مجدد شد. کلون های به دست آمده با pcr، هضم آنزیمی وتعیین توالی ارزیابی گردید. پلاسمید نهایی pq-esat-cfp نامیده شد. یافته ها: محصولات pcr، پلاسمید pt-esat-cfp و پلاسمید نهایی با هضم آنزیمی و تعیین توالی تایید شدند. نتیجه گیری : با بیان سازه ژنی pq-esat-cfp و تخلیص فیوژن پروتئین حاصل می توان از آن برای ساخت کیت تشخیصی مایکوباکتریوم توبرکولوزیس، جایگزین آزمایش توبرکولین، استفاده کرد.
similar resources
طراحی و ساخت پلاسمید حاوی کاست بیانی فیوژن پروتئین CFP-10، ESAT-6 مایکوباکتریوم توبرکولوزیس
زمینه و اهداف: در قرن گذشته تنها روش تشخیص عفونت نهفته مایکوباکتریوم توبرکولوزیس آزمایش پوستی توبرکولین بود. این آزمایش در بیماران آلوده با دیگر مایکوباکتریوم ها و در افراد واکسینه با BCG نتایج مثبت کاذب دارد. لذا، لزوم روش های تشخیصی کارآمد، سریع و دقیق مطرح می شود. دو آنتی ژن CFP-10و ESAT-6 در تمام مایکوباکتریوم های پاتوژن وجود دارد ولی در سویه های مولد واکسن BCGو مایکوباکتریوم های فرصت ط...
full textطراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب حاوی ترکیب ژن‌های Ag85B و TB10.4 مایکوباکتریوم توبرکولوزیس
Background & Aims: Tuberculosis (TB), caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb), remain as a leading causes of mortality among infectious diseases. The only current vaccine, bacillus Calmette-Gue´rin (BCG), displays highly variable efficiency for preventing tuberculosis. Thus, identification of protective antigens could be mentioned for designing new vaccines. Among different Mtb antigens,...
full textطراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب حاوی ترکیب ژن های ag۸۵b و tb۱۰.۴ مایکوباکتریوم توبرکولوزیس
پیش زمینه و هدف: علی رغم استفاده از واکسن ب.ث.ژ از سال 1921 تابه حال، هنوز بیماری سل به عنوان دومین عامل مرگ ومیر در بین بیماری های عفونی محسوب می گردد. با افزایش مقاومت عامل مولد سل (مایکوباکتریوم توبرکولوزیس) به آنتی بیوتیک های معمول و وسیع الطیف و همچنین با ظهور hiv و عفونت این ویروس با مایکوباکتریوم توبرکولوزیس، مقابله با این بیماری بیشتر به چالش کشیده شده است. شناخت آنتی ژن های مؤثر در ایم...
full textطراحی و ساخت سازه بیانی گیاهی جهت تولید پروتئین کایمری حاوی PGIP1 و PGIP2
امروزه کنترل بیماریهای گیاهی یکی از اهداف مهم اقتصاد جهانی است. پاتوژنهای قارچی با گسترش وسیع و سریعی که دارند خسارت زیادی به محصولات گیاهی وارد می کنند و به همین دلیل مبارزه با پاتوژنهای قارچی جزء برنامه های اصلی مبارزه با بیماریهای گیاهی در بسیاری از آزمایشگاههای تحقیقاتی می باشد. بیشترین آنزیمهای قارچی تجزیه کننده دیواره سلولی گیاهی که مطالعه شده اند پلی گالاکتوروناز ها (PG/polygalacturonase...
full textطراحی و ساخت پلاسمید حاوی ژن های her۲ و gp۹۶ به شکل فیوژن وبیان آن با استفاده از ژن کد کننده پروتئین سبز فلورسنت
واکسن های dna که با استفاده از ژن her2 تاکنون طراحی و در مدل های آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گرفته اند موفقیت نسبی داشته اند. این امر نیاز به افزایش پتانسیل این واکسن ها را نشان می دهد. شواهد موجود حاکی از این است که ملکول های شوک حرارتی ادجونت های قوی در ایمنی درمانی تومور می باشند. این ملکول ها قسمت های مختلف سیستم ایمنی ذاتی و اختصاصی را تحت تأثیر قرار می دهند. در این مطالعه از گلیکوپروتئین...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایرانجلد ۴، شماره ۳، صفحات ۷-۱۳
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023